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não mais que 48ºC em placas de Petri de 90 mm de diâmetro. Resfriar e solidificar. Semear na superfície
do meio de cultura um volume determinado, não menos que 0,1 mL da preparação inicial e/ou diluição
da amostra preparada.
7.2.1 Tempo e Temperatura Ótimas de Incubação
A menos que haja outra indicação, inverter a placa inoculada e colocá-la em incubadora regulada a 32,5 º
C ± 2,5ºC por 72 h ± 6h.
7.2.2 Leituras / cálculos
Após a incubação, contar as colônias em placa de Petri contendo de 30 a 300 colônias. O resultado do
número de colônias obtido (média aritmética das duplicatas das diluições analisadas) deve ser multiplicado
pela diluição da respectiva placa, expressando os resultados em Unidades Formadoras de Colônias (UFC)
por grama oumililitro. Se não houver nenhum crescimento nas placas inoculadas, o resultado será expresso
em menor que 10, multiplicado pela recíproca da menor diluição inoculada e validada.
7.3 PESQUISA DE PATÓGENOS E IDENTIFICAÇÃO DE MICRORGANISMOS
Microrganismos patogênicos são aqueles capazes de causar doenças. A resolução 481/99 da ANVISA
estabelece quais parâmetros microbiológicos devem ser controlados em produtos de higiene pessoal
perfumaria e cosméticos. Para os microrganismos patogênicos recomenda-se a detecção de coliformes
totais e fecais (Escherichia coli), Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa e Clostrídios Sulfito
redutores (exclusivamente para talcos), sendo o critério de aceitação de ausência/g ou mL destes
patógenos no produto.
7.3.1 Coliformes Totais e Fecais
(Escherichia coli)
;
Para opreparoda amostra utilizarmateriais esterilizados, equipamentos e técnicas assépticas. Apreparação
inicial deverá ser realizada com agente solubilizante adequado, o tempo transcorrido entre o momento
da inoculação até que entre em contato com o caldo de enriquecimento e o fim do preparo não deve
exceder 45 minutos. O enriquecimento é preparado a partir de uma amostra de no mínimo 1g ou 1 mL
adequadamente homogeneizado do produto a ser analisado, dispersado em no mínimo 9 mL de caldo
de enriquecimento.
Incubar a preparação inicial em caldo a 32,5 ºC ± 2,5ºC por no mínimo 20h (máximo 72h).
Estriar uma alíquota do caldo de enriquecimento incubado utilizando alça estéril sobre a superfície de
meio Agar MacConkey, de modo a obter colônias isoladas.
