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Alíquotas são retiradas em dois momentos (no início e após um tempo de contato definido pelo método),
diluídas e semeadas em placas para contagem, segundo o protocolo estabelecido. A confirmação da
ausência de declínio significativo na contagem entre o inoculo diluído no neutralizante e aquele diluído
em diluente universal indica que a neutralização foi eficiente, e não afeta o inoculo.
Se as placas de controle do inoculo apresentarem crescimento normal e não for observado crescimento
nas placas das diluições mais baixas, esta é uma clara indicação de que o neutralizante não é adequado,
e outro deve ser selecionado.
A descrição passo-a-passo se encontra descrita na norma EN 1040 (ref.) e ASTM E-1054 (ref.)
7.4.6 Temperatura e tempo de incubação
Tabela 15:
Condições para Preparo do Inóculo
Tabela 16:
Condições dos parâmetros para a análise microbiológica do teste
USP 37
CTFA
ASTM 640-06
Bactérias
32,5 ± 2,5ºC
18 a 24h
30 a 37ºC
18 a 48h
35 ± 2ºC
24 a 48h
Leveduras
22,5 ± 2,5ºC
44 a 52h
25 a 35ºC
24 a 48h
25 ± 2ºC
48 a 72h
Fungos
filamentosos
22,5 ± 2,5ºC
6 a 10 dias
20 a 30ºC
7 a 28 dias
25 ± 2ºC
5 a 7 dias
USP 37
CTFA
ASTM 640-06
Bactérias
22,5 ± 2,5ºC
30 a 37ºC
24 a 48h
35 ± 2ºC
48 a 72h
Leveduras
22,5 ± 2,5ºC
25 a 35ºC
48 a 72h
Opcional
Fungos
filamentosos
22,5 ± 2,5ºC
20 a 30ºC
3 a 7 dias
Opcional
Fungos (leveduras +
fungos filamentosos)
-
-
25 ± 2ºC
3 a 5 dias