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Figura 06:
Vista do topo - método de halo por orifícios de ágar
Para outras aplicações, em especial na área cosmética, o teste é realizado utilizando-se um suporte, como
o papel de filtro cortado em círculos, de 40 a 50 mm de diâmetro, esterilizados. Sobre este suporte, o
produto é aplicado, mantendo-se a quantidade aplicada nos Branco e Controle. Neste caso, somente um
suporte é utilizado em cada placa.
7.5.3 Leitura
A formação do halo de inibição, ausência/presença de crescimento microbiano sobre o corpo de prova, e
as medidas do halo são anotadas.
No caso de antibióticos, a medida é realizada pelo diâmetro do halo, ou seja, de toda a zona inibitória.
No caso em que o tamanho do disco é diferente, as regras do método NCCLS devem ser ajustadas.
Ou seja, não há como mensurar quantitativamente a concentração do conservante.
7.5.4 Critério de aceitação
Considerar que no teste com produtos de HPPC, o tamanho do halo não é muito relevante. Mas a
formação clara de um halo de inibição indica presença de atividade antimicrobiana, que pode ser somente
microbiostático, mas também microbicida.
O tamanho do halo formado tem relação direta com a migração do agente antimicrobiano através da
superfície de Ágar. Mantendo uma variável, e rigorosamente os demais parâmetros do ensaio, é possível
correlacionar a variável, como a concentração do antimicrobiano.
P
ENICILINDROS
,
QUE
SÃO
RETIRADOS
APÓS O
ENDURECIMENTO
DO
AGAR
. O
FUNDO
É
SELADO
COM
AGAR
,
E
DEPOIS
APROX
.
100
A
130
µL
DA
SOLUÇÃO
É
DEPOSITADA
EM
CADA
POÇO
.
